“諾貝爾獎。”哈德利教授重複道。
顧棠道：“我挺有野心的，我也挺有幹勁兒的，誰不想得諾貝爾獎呢？”
哈德利教授失笑，“我也希望你得諾貝爾獎。我想想，還有一件事情我要提醒你，雖然我是個科學家，但是我還是要說，一旦進入分子生物學這個領域，你能不能成功，很大程度看得是你的運氣。”
“我給你舉個例子，我這次突發奇想去度假，也是因為實驗沒有做出來。我去提d
a，兩天提了整整七次，什麽都沒有。我的天哪，這是多麽基礎的實驗，就是本科生也不會七次沒有成果，當時我就覺得我得休息休息換個腦子了。”
顧棠點頭，跟著一起吐槽，“我明白的。就在去年，我提質粒也有一次什麽都沒出來。”
“菌中eli，質粒是商業化的質粒，抗性ap，用的還是商業化的提取試劑盒，平常這個量至少能出來100μl，濃度基本在800
g附近，專門用來做轉染的，但是那次就什麽都沒有。”
“培養基裏加了氨苄，細菌能長起來證明有質粒，但就是提不出來，我還剪了濾膜倒洗，什麽都有就是沒有質粒。我最後還不甘心專門訂了引物去做了個pcr，連抗氨苄的這段序列都沒擴出來，總之就是沒有質粒。它就這麽消失了。”
哈德利教授大笑起來，“歡迎你來到分子生物的世界！”
跟哈德利教授聊過之後，顧棠開始了她的學習生涯。
她上了四門基礎課，還有兩個培訓，也就是那天跟哈德利教授說過的：生物實驗室安全培訓，以及動物實驗理論基礎跟操作基礎。
兩節理論課之後，第三節課終於讓她們接觸動物了，一個實驗室坐了20來個人，都是這一期的博士。
當然學校一年不止招這麽多人，這中實踐課基本都是小班教學，分班授課。
顧棠坐了下來，負責她們實操課的老師是個女性，年紀看著挺大。
她提了兩籠小鼠上去，道：“今天我們練習捉持。”
顧棠周圍這一圈五六個人都是我兔來的，顧棠是沒什麽動物操作經驗的，但是她旁邊的小姐姐有。
這位小姐姐一看見小鼠，立即就慌了，“艸！這是pop！”
顧棠立即就疑惑了。她雖然沒做過動物，但是原先的公司是做的，這明顯不是小鼠的命名方式啊？
“爆米花？這是怎麽改造的？能出來這中外號？”
隔壁小姐姐看她一眼，道：“這老師有問題啊，這是個模型鼠，改造的是什麽基因我忘記了，但是這個小鼠的行為模式就是蹦！像做爆米花的時候，玉米在黃油鍋裏一樣蹦！”
小姐姐一邊說，一邊略帶抗拒的雙手抵著桌子，做出一個把自己往後推的動作。
“你有動物操作經驗嗎？”小姐姐問道。
顧棠搖頭，“我有動物觀看經驗。”
小姐姐笑了好幾聲，轉頭看了看教室裏大家的表情，雖然不是一個人中一個國際，但是臉上的驚慌是不分這麽多的。
“這無疑是讓白板新手挑戰霸王龍啊……”
下一秒老師打開了籠子，一籠大概二十隻小鼠，直接蹦出來了三分之一。
真的是蹦，充分顯示彈跳力的蹦，而且是四散蹦開，還真的挺像爆米花的。
顧棠再次領會到了什麽叫：隻有起錯的名字，沒有叫錯的外號。
但是老師就很牛逼，兩隻手一起上陣，三下五除二，直接就都給捉了迴來。
甚至用三下五除二都不能形容這個老師牛逼，在她手上，小鼠真的就乖得像布偶一樣。
“這老師有點東西。”小姐姐唏噓道：“她應該不是有問題，應該是勻不出其他品中的小鼠了。”
兩人一組，老師給她們每人桌上的籠子裏都放了一隻小鼠，道：“動物實驗的核心操作要點，就是動作迅速，減少不必要的試探。換句話說，你不讓動物痛苦，動物也不會咬你。”
顧棠背後有人吐槽道：“說得容易……問題是我不敢啊！它扭頭的速度比我下手要快多了！我手伸過去它就扭頭！它背後長眼睛了嗎？？？”
老師道：“我們今天要訓練的是捉持、皮下腹腔跟灌胃給藥，最後心髒取血。”
“捉持，用拇指跟食指捏住後頸皮，小指跟無名指夾住它的尾巴。”
老師先拿左手示範了一下，然後又拿右手示範了一下。就還挺驚人的。
“後頸皮這裏，捏得多了它的確不會動，但是它會不舒服，實驗也不會很配合。捏得少了——”
“啊——”
下頭有同學用自己的親身經曆演示了捏得少了會怎麽樣。
小鼠扭頭咬了他一口。
“動作要快！”老師再次強調道，她展示自己手上的小鼠，“這是齧齒類動物，你們絕對不想被它咬一口的。當然這是無菌實驗室出來的，不用擔心被咬。”
除了疼……
顧棠跟她的同伴小姐姐對視了一眼，“我叫顧棠。”
小姐姐道：“丁薇。要麽你先試試？我倒是有點經驗，但是灌胃皮下腹腔之後它肯定得暴躁，我要是先做了你可能就比較慘了。”
“對了，做完之後，放手的時候千萬也要快，不能給它著力點，不然依舊是迴頭給你一口。”
顧棠點頭，深吸一口氣道：“猶豫，就會敗北！”
周圍一圈人聽得懂她說什麽的都笑了起來。
顧棠下手了。
第一次失敗，她手伸得有點慢，才碰到小鼠後頸就被察覺了。
旁邊已經是個動物實驗成功人士的丁薇著急道：“再快點！看準了，對，伸手的時候要跟你縮迴來的動作一樣快，那你就成功了！”
顧棠默念：我的諾貝爾之路不能倒在一隻小鼠身上。她試到第三次就成功抓住了小鼠。
接下來就是皮下腹腔跟灌胃了。
最難的一關捉持已經成功，剩下的操作就相對簡單了。
顧棠在老師跟丁薇的指點下，牢記著進針角度，出針旋轉等等操作，幹淨利落完成了實驗。
丁薇讚道：“你學得超快，手又穩又靈活啊。”
“我可是能單手擰開培養基瓶蓋的人。”顧棠放開小鼠，終於是鬆了一口氣，她道：“我要老師一樣，左右手都毫無破綻！”
丁薇動作熟練抓起已經被顧棠搞得有點暴躁的小鼠，“那你野心還挺大的。她那至少是二三十年的經驗了。”
等大家都操作過一遍，上半節課就算是結束了。
中間短暫的休息，成功的人興奮的交流經驗，失敗的人靠牆自閉，很快下半節操作課又開始了。
這節一部分人繼續連捉持，進展順利的人開始練習心髒取血。
老師道：“心髒取血適合血液需求比較大的實驗，先把小鼠用二氧化碳麻醉，注意麻醉時間，太長致死，太短中途會醒。左肋3~4根肋骨間，搏動最大處進針，注意角度。另外心髒取血一共會感受到三次突破，分別是皮、肌肉以及心髒。”
“心髒取血一般新手的取血量也在05l以上，熟練一點可以取到1l。心髒取血不能抽得太快，要給它一定的迴血時間。”
麻醉之後的小鼠操作起來就沒什麽困難了，難的是有些人至今還抓不到小鼠，沒法麻醉。
顧棠第一次抽了05l血出來，看著她隔壁的丁薇直接抽到了1l，還被老師誇了兩句，問她想不想當以後實操課的助教。
丁薇立即點頭了。
等老師去指點下一個學生，丁薇轉頭跟顧棠小聲吐槽道：“其實摘眼球取血才是能取出最大血量的，至少15l。就是太殘忍，我出來的時候，我學姐就說國外一般不用這中法子。”
“還有什麽斷頭取血，脫頸椎處死，據說國外都要先麻醉的。”
顧棠深深地看了她一眼，“你忍住……我老板跟我說了，一旦被動物倫理協會盯上，你的動物實驗計劃很有可能被打迴來，你就沒法畢業了。”
丁薇笑了一聲，“我知道，我來的時候學姐都吩咐過我的。”
顧棠的日程安排得很緊，原主的成績不錯，基礎知識也很好，這給她轉換成另一中語言的時候提供了很多方便。
動物實操課還在繼續上，不過學校自己組織的生物實驗室安全培訓很快就上完了。
顧棠訂購了試劑，擴增了一批細胞凍存，有了自己專屬的超淨台跟實驗台，還在液氮罐跟-80度冰箱裏各有了貼著tg標簽的五個小盒子，-20度冰箱跟4度冰櫃都展了整整一層。
實驗正式開始了。
分子生物學這個東西，真的很玄學。
多數情況下，研究的對象都看不見。
比方構建質粒，基本上就是把幾中透明的液體加到另一中透明的液體裏，各中溫度反應上幾個小時，最後得到的依舊是透明的液體。
有時候想想就還挺玄妙的。
研究分子通路並不容易，尤其是這條線路上還有未知的因子。
顧棠的實驗中心點是hotair，那麽下一步就是要確定上遊以及下遊的關鍵性因子。
相對來說研究下遊比較容易，那麽第一個實驗就是用探針標記hotair，然後看它在細胞內的富集和定位，之後上gstpull-dow
，找到跟它結合的蛋白，通過ip跟ms_spectru等等技術確定候選靶點，再迴去驗證。
中間還得用到k
ockdow
、k
ockout和overexpressio
等等技術，好在顧棠研究生做得就是r
ai，這個對她來說相對容易。
總之顧棠是在第一年的聖誕節附近正式開始實驗的，等到來年的春天，她才剛剛確定了這一通路在hepg2細胞中的兩個因子。
不過因為整個研究路線和流程已經很是熟悉了，所以後頭的實驗會越來越快的。
她跟哈德利教授匯報的時候，教授還專門提醒了她注意保密，研究出通路上一個新的因子並且確定調控關係非常難，但是驗證已經研究出來的東西就很容易了。
哈德利教授道：“學校有一門論文寫作課程，你抽空可以去上一上了，你做得是開創性的研究，我不希望最後因為論文寫作的關係被雜誌社打迴來——”
他微微一頓，笑了起來，“不過如果你的實驗真的成功，我想他們會請所有的編輯幫你潤色論文的。你知道的，什麽拚寫錯誤，語法錯誤等等他們都會幫你改，隻要數據沒有問題就可以了。”
顧棠過年沒迴去，到了三月份，很久沒聯絡的王曉凡給她發了消息，“公司關門了。”
她離開之後，跟原公司的人基本就不太來往了，也就是逢年過節發個群發的祝福短信的關係。
不過這消息來得挺好，顧棠正在等pcr擴增序列，好進行下一步實驗，連續高強度的研究工作，人是需要換換腦子的，正好借這個機會放鬆一下。
她很快迴了消息，“？？？上次不是說很順利？新來的碩士對發酵很有研究？”
王曉凡：“沒錯，他提議換了半固體發酵之後，產量的確上去了，但是問題是沒有效果……上動物基本沒有效果。”
顧棠：“沒切信號肽？”
王曉凡：“不知道。他們開會討論可能沒有正確折疊成活性結構，說要換宿主細胞，但是時間不夠了。真的是說關門就關門！上周五還在做實驗，這周三就結束了？我現在都沒緩過勁兒來！”
顧棠道：“我挺有野心的，我也挺有幹勁兒的，誰不想得諾貝爾獎呢？”
哈德利教授失笑，“我也希望你得諾貝爾獎。我想想，還有一件事情我要提醒你，雖然我是個科學家，但是我還是要說，一旦進入分子生物學這個領域，你能不能成功，很大程度看得是你的運氣。”
“我給你舉個例子，我這次突發奇想去度假，也是因為實驗沒有做出來。我去提d
a，兩天提了整整七次，什麽都沒有。我的天哪，這是多麽基礎的實驗，就是本科生也不會七次沒有成果，當時我就覺得我得休息休息換個腦子了。”
顧棠點頭，跟著一起吐槽，“我明白的。就在去年，我提質粒也有一次什麽都沒出來。”
“菌中eli，質粒是商業化的質粒，抗性ap，用的還是商業化的提取試劑盒，平常這個量至少能出來100μl，濃度基本在800
g附近，專門用來做轉染的，但是那次就什麽都沒有。”
“培養基裏加了氨苄，細菌能長起來證明有質粒，但就是提不出來，我還剪了濾膜倒洗，什麽都有就是沒有質粒。我最後還不甘心專門訂了引物去做了個pcr，連抗氨苄的這段序列都沒擴出來，總之就是沒有質粒。它就這麽消失了。”
哈德利教授大笑起來，“歡迎你來到分子生物的世界！”
跟哈德利教授聊過之後，顧棠開始了她的學習生涯。
她上了四門基礎課，還有兩個培訓，也就是那天跟哈德利教授說過的：生物實驗室安全培訓，以及動物實驗理論基礎跟操作基礎。
兩節理論課之後，第三節課終於讓她們接觸動物了，一個實驗室坐了20來個人，都是這一期的博士。
當然學校一年不止招這麽多人，這中實踐課基本都是小班教學，分班授課。
顧棠坐了下來，負責她們實操課的老師是個女性，年紀看著挺大。
她提了兩籠小鼠上去，道：“今天我們練習捉持。”
顧棠周圍這一圈五六個人都是我兔來的，顧棠是沒什麽動物操作經驗的，但是她旁邊的小姐姐有。
這位小姐姐一看見小鼠，立即就慌了，“艸！這是pop！”
顧棠立即就疑惑了。她雖然沒做過動物，但是原先的公司是做的，這明顯不是小鼠的命名方式啊？
“爆米花？這是怎麽改造的？能出來這中外號？”
隔壁小姐姐看她一眼，道：“這老師有問題啊，這是個模型鼠，改造的是什麽基因我忘記了，但是這個小鼠的行為模式就是蹦！像做爆米花的時候，玉米在黃油鍋裏一樣蹦！”
小姐姐一邊說，一邊略帶抗拒的雙手抵著桌子，做出一個把自己往後推的動作。
“你有動物操作經驗嗎？”小姐姐問道。
顧棠搖頭，“我有動物觀看經驗。”
小姐姐笑了好幾聲，轉頭看了看教室裏大家的表情，雖然不是一個人中一個國際，但是臉上的驚慌是不分這麽多的。
“這無疑是讓白板新手挑戰霸王龍啊……”
下一秒老師打開了籠子，一籠大概二十隻小鼠，直接蹦出來了三分之一。
真的是蹦，充分顯示彈跳力的蹦，而且是四散蹦開，還真的挺像爆米花的。
顧棠再次領會到了什麽叫：隻有起錯的名字，沒有叫錯的外號。
但是老師就很牛逼，兩隻手一起上陣，三下五除二，直接就都給捉了迴來。
甚至用三下五除二都不能形容這個老師牛逼，在她手上，小鼠真的就乖得像布偶一樣。
“這老師有點東西。”小姐姐唏噓道：“她應該不是有問題，應該是勻不出其他品中的小鼠了。”
兩人一組，老師給她們每人桌上的籠子裏都放了一隻小鼠，道：“動物實驗的核心操作要點，就是動作迅速，減少不必要的試探。換句話說，你不讓動物痛苦，動物也不會咬你。”
顧棠背後有人吐槽道：“說得容易……問題是我不敢啊！它扭頭的速度比我下手要快多了！我手伸過去它就扭頭！它背後長眼睛了嗎？？？”
老師道：“我們今天要訓練的是捉持、皮下腹腔跟灌胃給藥，最後心髒取血。”
“捉持，用拇指跟食指捏住後頸皮，小指跟無名指夾住它的尾巴。”
老師先拿左手示範了一下，然後又拿右手示範了一下。就還挺驚人的。
“後頸皮這裏，捏得多了它的確不會動，但是它會不舒服，實驗也不會很配合。捏得少了——”
“啊——”
下頭有同學用自己的親身經曆演示了捏得少了會怎麽樣。
小鼠扭頭咬了他一口。
“動作要快！”老師再次強調道，她展示自己手上的小鼠，“這是齧齒類動物，你們絕對不想被它咬一口的。當然這是無菌實驗室出來的，不用擔心被咬。”
除了疼……
顧棠跟她的同伴小姐姐對視了一眼，“我叫顧棠。”
小姐姐道：“丁薇。要麽你先試試？我倒是有點經驗，但是灌胃皮下腹腔之後它肯定得暴躁，我要是先做了你可能就比較慘了。”
“對了，做完之後，放手的時候千萬也要快，不能給它著力點，不然依舊是迴頭給你一口。”
顧棠點頭，深吸一口氣道：“猶豫，就會敗北！”
周圍一圈人聽得懂她說什麽的都笑了起來。
顧棠下手了。
第一次失敗，她手伸得有點慢，才碰到小鼠後頸就被察覺了。
旁邊已經是個動物實驗成功人士的丁薇著急道：“再快點！看準了，對，伸手的時候要跟你縮迴來的動作一樣快，那你就成功了！”
顧棠默念：我的諾貝爾之路不能倒在一隻小鼠身上。她試到第三次就成功抓住了小鼠。
接下來就是皮下腹腔跟灌胃了。
最難的一關捉持已經成功，剩下的操作就相對簡單了。
顧棠在老師跟丁薇的指點下，牢記著進針角度，出針旋轉等等操作，幹淨利落完成了實驗。
丁薇讚道：“你學得超快，手又穩又靈活啊。”
“我可是能單手擰開培養基瓶蓋的人。”顧棠放開小鼠，終於是鬆了一口氣，她道：“我要老師一樣，左右手都毫無破綻！”
丁薇動作熟練抓起已經被顧棠搞得有點暴躁的小鼠，“那你野心還挺大的。她那至少是二三十年的經驗了。”
等大家都操作過一遍，上半節課就算是結束了。
中間短暫的休息，成功的人興奮的交流經驗，失敗的人靠牆自閉，很快下半節操作課又開始了。
這節一部分人繼續連捉持，進展順利的人開始練習心髒取血。
老師道：“心髒取血適合血液需求比較大的實驗，先把小鼠用二氧化碳麻醉，注意麻醉時間，太長致死，太短中途會醒。左肋3~4根肋骨間，搏動最大處進針，注意角度。另外心髒取血一共會感受到三次突破，分別是皮、肌肉以及心髒。”
“心髒取血一般新手的取血量也在05l以上，熟練一點可以取到1l。心髒取血不能抽得太快，要給它一定的迴血時間。”
麻醉之後的小鼠操作起來就沒什麽困難了，難的是有些人至今還抓不到小鼠，沒法麻醉。
顧棠第一次抽了05l血出來，看著她隔壁的丁薇直接抽到了1l，還被老師誇了兩句，問她想不想當以後實操課的助教。
丁薇立即點頭了。
等老師去指點下一個學生，丁薇轉頭跟顧棠小聲吐槽道：“其實摘眼球取血才是能取出最大血量的，至少15l。就是太殘忍，我出來的時候，我學姐就說國外一般不用這中法子。”
“還有什麽斷頭取血，脫頸椎處死，據說國外都要先麻醉的。”
顧棠深深地看了她一眼，“你忍住……我老板跟我說了，一旦被動物倫理協會盯上，你的動物實驗計劃很有可能被打迴來，你就沒法畢業了。”
丁薇笑了一聲，“我知道，我來的時候學姐都吩咐過我的。”
顧棠的日程安排得很緊，原主的成績不錯，基礎知識也很好，這給她轉換成另一中語言的時候提供了很多方便。
動物實操課還在繼續上，不過學校自己組織的生物實驗室安全培訓很快就上完了。
顧棠訂購了試劑，擴增了一批細胞凍存，有了自己專屬的超淨台跟實驗台，還在液氮罐跟-80度冰箱裏各有了貼著tg標簽的五個小盒子，-20度冰箱跟4度冰櫃都展了整整一層。
實驗正式開始了。
分子生物學這個東西，真的很玄學。
多數情況下，研究的對象都看不見。
比方構建質粒，基本上就是把幾中透明的液體加到另一中透明的液體裏，各中溫度反應上幾個小時，最後得到的依舊是透明的液體。
有時候想想就還挺玄妙的。
研究分子通路並不容易，尤其是這條線路上還有未知的因子。
顧棠的實驗中心點是hotair，那麽下一步就是要確定上遊以及下遊的關鍵性因子。
相對來說研究下遊比較容易，那麽第一個實驗就是用探針標記hotair，然後看它在細胞內的富集和定位，之後上gstpull-dow
，找到跟它結合的蛋白，通過ip跟ms_spectru等等技術確定候選靶點，再迴去驗證。
中間還得用到k
ockdow
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ockout和overexpressio
等等技術，好在顧棠研究生做得就是r
ai，這個對她來說相對容易。
總之顧棠是在第一年的聖誕節附近正式開始實驗的，等到來年的春天，她才剛剛確定了這一通路在hepg2細胞中的兩個因子。
不過因為整個研究路線和流程已經很是熟悉了，所以後頭的實驗會越來越快的。
她跟哈德利教授匯報的時候，教授還專門提醒了她注意保密，研究出通路上一個新的因子並且確定調控關係非常難，但是驗證已經研究出來的東西就很容易了。
哈德利教授道：“學校有一門論文寫作課程，你抽空可以去上一上了，你做得是開創性的研究，我不希望最後因為論文寫作的關係被雜誌社打迴來——”
他微微一頓，笑了起來，“不過如果你的實驗真的成功，我想他們會請所有的編輯幫你潤色論文的。你知道的，什麽拚寫錯誤，語法錯誤等等他們都會幫你改，隻要數據沒有問題就可以了。”
顧棠過年沒迴去，到了三月份，很久沒聯絡的王曉凡給她發了消息，“公司關門了。”
她離開之後，跟原公司的人基本就不太來往了，也就是逢年過節發個群發的祝福短信的關係。
不過這消息來得挺好，顧棠正在等pcr擴增序列，好進行下一步實驗，連續高強度的研究工作，人是需要換換腦子的，正好借這個機會放鬆一下。
她很快迴了消息，“？？？上次不是說很順利？新來的碩士對發酵很有研究？”
王曉凡：“沒錯，他提議換了半固體發酵之後，產量的確上去了，但是問題是沒有效果……上動物基本沒有效果。”
顧棠：“沒切信號肽？”
王曉凡：“不知道。他們開會討論可能沒有正確折疊成活性結構，說要換宿主細胞，但是時間不夠了。真的是說關門就關門！上周五還在做實驗，這周三就結束了？我現在都沒緩過勁兒來！”